穩定細胞株構建
▏ 服務(wù)背景
穩定細胞株構建是指將外源DNA克隆到具有某種抗性的載體上,載體被轉染到宿主細胞并整合到宿主染色體中,用載體中所含的抗性標志進(jìn)行篩選。最常用的真核表達載體的抗性篩選標志物有新霉素(neomycin)、潮霉素(hygromycin)和嘌呤霉素(puromycin),常用G418來(lái)代替新霉素進(jìn)行選擇性篩選,篩選得到可穩定表達目的蛋白,或者穩定表達沉默特定基因的細胞株。
穩定細胞株的構建周期長(cháng)、難度大,每一步都很關(guān)鍵,尤其是細胞轉染,常用物理方法(電轉)、化學(xué)方法(脂質(zhì)體等)、生物方法(病毒),根據不同的實(shí)驗條件,選擇最好的方法,來(lái)達到實(shí)驗目的。
▏ 服務(wù)原理
穩定細胞株構建的基本原理是用基因導入工具或基因編輯工具,改造原始細胞基因組,使改造后的細胞具有某些特定表型,并經(jīng)過(guò)抗性篩選或其他篩選方法,使其表型能長(cháng)期傳代穩轉。
▏ 服務(wù)優(yōu)勢
·科佰擁有龐大的母細胞庫和數據庫資源,熟悉細胞特性。
·多樣而靈活的基因導入和編輯工具。
·豐富的構建經(jīng)驗和成功案例。
· 快速高效的開(kāi)發(fā)流程。
·嚴格的檢測和質(zhì)控。
·銜接穩轉細胞株應用方法開(kāi)發(fā)與優(yōu)化。
·提供全流程和完整系統的開(kāi)發(fā)。
▏ 平臺介紹
科佰生物在穩定細胞株構建上擁有豐富的經(jīng)驗,熟悉每一步操作,尤其對關(guān)鍵步驟有獨到的經(jīng)驗,成功為眾多科研客戶(hù)構建目的細胞株(過(guò)表達、可誘導過(guò)表達、沉默、可誘導沉默、報告基因等等)。
▏ 服務(wù)流程